在细胞生物学与糖组学研究中,对细胞表面糖蛋白及多糖的分布进行原位示踪,是解析细胞生理状态的关键。然而,普通染料往往存在光稳定性差、标记效率低的问题。Alexa Fluor 647标记的刀豆蛋白A(AF647-Concanavalin A)作为一种高性能的近红外荧光探针,凭借其优异的光学性能和特异性糖识别能力,成为细胞表面糖链分析、内吞作用追踪及组织切片染色的优选试剂。
试剂基本参数
? 中文名称:Alexa Fluor 647标记刀豆蛋白A
? 英文名称:AF647-Concanavalin A / AF647-ConA
? 激发/发射波长:Ex/Em ≈ 650/668 nm
? 纯度:蛋白质纯度>95%(SDS-PAGE)
? 储存条件:避光,-20℃保存
理化性质解析
刀豆蛋白A(ConA)是一种从刀豆中提取的植物凝集素,能特异性识别并结合α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基。AF647是一种亮度高、光稳定性极佳的远红光/近红外荧光染料。将AF647共价偶联至ConA后,既保留了凝集素对糖基的特异性识别活性,又赋予了复合物深层组织穿透力强、背景荧光干扰低的特性。该探针在水溶液中具有良好的分散性,且不易发生染料聚集导致的荧光猝灭。
科研应用领域
? 细胞表面糖蛋白成像:利用共聚焦显微镜,通过AF647-ConA标记活细胞或固定细胞表面的甘露糖基化蛋白,观察其在细胞膜上的分布与动态变化。
? 高尔基体与内体示踪:ConA可被细胞内吞并转运至高尔基体,利用AF647的长波长特性,可与其他颜色的荧光蛋白(如GFP、RFP)进行多色标记,研究细胞器间的物质运输。
? 组织切片染色:在病理学科研中,用于标记组织切片中的特定糖结构,评估细胞分化状态或组织结构的完整性。
? 凝胶染色:用于SDS-PAGE凝胶中糖蛋白的特异性荧光染色。
总结
AF647-刀豆蛋白A将糖识别的特异性与近红外荧标的灵敏度完美结合,极大地提升了糖生物学研究的效率与准确性,是解析细胞表面糖萼结构及细胞内吞路径的强有力工具。
科研专用,严禁用于人体。
