一、试剂信息

TCO-NHS 中文名称反式环辛烯-琥珀酰亚胺活化酯，常用缩写 TCO-NHS，同义写法 NHS-TCO、反式环辛烯 - NHS 活性酯、TCO 琥珀酰亚胺酯交联试剂，归属于逆狄尔斯阿尔德点击化学活化交联试剂，活性端 NHS 酯可靶向伯氨基，TCO 环烯基团适配四嗪基团发生生物正交反应，是生物偶联方向基础科研用料，长尾关键词：氨基靶向 TCO 交联试剂、NHS 活化反式环辛烯、生物正交化学 TCO 活性酯。

二、化学结构

分子包含双功能结构单元，琥珀酰亚胺活化酯片段作为氨基反应活性端，五元酰亚胺环搭配羧基活化酯键，可温和结合多肽、蛋白表面伯氨基；另一侧反式环辛烯八元环状烯烃结构，高选择性和四嗪基团发生生物正交偶联，两段结构通过烷基连接链共价相连，连接碳链长度优化兼顾水溶性与反应活性。

三、理化性质

外观多为白色至浅米色结晶粉末，易溶于无水 DMSO、乙腈，遇纯水快速发生活化酯水解；常温密闭干燥条件下结构稳定，接触潮湿空气会逐步损耗活性；无紫外可见光区域特征吸收，仅依靠后续偶联荧光底物实现产物检测，需隔绝水汽保存。

四、场景化应用案例

常用于体外蛋白、多肽的定点改性，利用 NHS 端修饰蛋白表面氨基，引入 TCO 官能团后，后续搭配四嗪修饰荧光染料完成两步正交标记；在体外高分子载体改性实验中，对氨基改性葡聚糖进行 TCO 基团接枝，构建可二次偶联的功能化多糖材料。

五、选型/使用小贴士

目标底物为氨基类生物原料时选用 TCO-NHS，全部反应溶剂优先除水；现配现用母液，缓冲液优选弱碱性无游离氨基配方；过量试剂通过透析法去除，降低游离试剂干扰实验结果。