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「渝偲分享」FITC-葡萄糖/异硫氰酸荧光素-葡萄糖/FITC-Glucose/荧光素标记葡萄糖/Glucose-FITC

2025-10-11

FITC-葡萄糖(异硫氰酸荧光素标记葡萄糖)是一种通过化学共价键将荧光染料FITC与葡萄糖分子结合形成的荧光探针。该分子在蓝色光激发下可发射黄绿色荧光(发射波长范围约520-530 nm),因其独特的荧光特性与生物相容性,被广泛应用于糖分子动态追踪、细胞摄取研究及材料科学中的分子相互作用分析。

合成路线:共价键构建与反应条件优化

FITC-葡萄糖的合成核心在于FITC的异硫氰酸酯基团(-N=C=S)与葡萄糖分子羟基(-OH)或氨基(-NH?)的亲核取代反应。典型流程包括:

荧光染料溶解:将FITC溶解于二甲基亚砜(DMSO)或二甲亚酰胺(DMF)等极性溶剂中,形成高反应活性溶液。

糖分子预处理:若使用天然葡萄糖,需通过化学修饰(如引入氨基)增强反应位点特异性;若直接使用6-氨基葡萄糖等衍生物,则可省略此步骤。

共价键形成:在碱性缓冲液(pH 8.0-9.0)中,FITC的异硫氰酸酯基团与糖分子的氨基或羟基发生反应,生成稳定的硫脲键(-NH-CO-NH-)。此步骤需控制反应温度与时间,以平衡反应效率与副产物生成。

纯化与分离:通过透析、凝胶过滤色谱或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的FITC及小分子杂质,获得高纯度产物。

结构特性:荧光与糖分子的协同效应

FITC-葡萄糖的荧光特性源于FITC的共轭苯并氧杂蒽环结构,其高量子产率与光稳定性使其适用于长时间荧光成像。葡萄糖分子作为载体,通过糖苷键连接的多个羟基可调节整体分子的水溶性及生物相容性。标记后,分子的荧光强度可能因糖分子空间位阻或溶剂环境变化而略有波动,但整体仍保持FITC的典型光谱特征。

应用领域:分子追踪与材料分析

FITC-葡萄糖的荧光特性使其成为研究糖分子动态行为的理想工具。例如,通过激光共聚焦显微镜可实时观察糖分子在细胞膜表面的吸附与内化过程;结合流式细胞术,可定量分析不同细胞系对糖分子的摄取效率。此外,该分子还可用于材料科学中糖基化表面的功能化修饰,通过荧光信号变化监测分子间相互作用强度。

操作注意事项:稳定性与存储条件

FITC-葡萄糖对光、pH及温度敏感,需避光保存于-20℃以下环境,避免反复冻融。实验操作时应使用新鲜配制的溶液,防止荧光衰减。若用于复杂体系研究,需预先评估FITC标记对目标分子原有性质的影响,确保实验结果的可靠性。

注意:仅用于科研,不能用于人体实验。

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